小麦中呕吐毒素检测方法

小麦中呕吐毒素检测方法选用CSY-YG701真菌毒素荧光定量检测仪（深圳市芬析仪器制造有限公司）、电子天平、离心机、粉粹机 、涡旋振荡器检测设备，该方法操作简单，结果准确，整体测试时间15分钟左右。

呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，属单端孢霉烯族化合物。由于它可以引起猪的呕吐而得名，呕吐毒素DON的含量超过1mg/kg时就会对人及牲畜的健康产生损害，欧盟分类标准为三级致癌物。

我国国标GB2761-2011中规定了谷物及谷物制品中(包括玉米、玉米面、大麦、小麦、麦片和小麦粉)呕吐毒素DON的*为1000 μg/kg。

美国的FDA（食品及药物管理局)规定食品中的呕吐毒素DON的安全标准是1mg/kg，同时，美国制定了饲料用小麦及小麦制品中呕吐毒素DON的允许*不得超过4mg/kg，而欧盟制定的呕吐毒素DON*则相对较严，谷粉及玉米粉中允许*≤0.75 mg/kg。

一、实验仪器

1、CSY-YG701真菌毒素荧光定量检测仪（深圳市芬析仪器制造有限公司）

2、电子天平

3、离心机

3、粉粹机  

4、涡旋振荡器

5、可调移液器1000-5000ul 可调移液器 20-200ul

二、样品处理

1、样品提取液配置：取一份体积的提取液加九份体积的蒸馏水，混匀后即为样品提取液。

2、样品处理：准确称取2.0g粉碎均匀的谷物样本，放入50ml离心管或者锥形瓶中，加入10ml样品提取液，用旋涡振荡器震荡3分钟混匀，混匀后即为样品液。

3、混匀后，取1.5ml均匀的样品液在离心管，并在3500转以上离心5分钟。

4. 配待测液：取离心液上清液100ul+300ul样品提取液震荡5秒混匀。

三、样品检测

1、取60ul待测液+60ul荧光标记物,放入新的离心管中

2、把移液器刻度调至90ul，然后在离心管中吸吐3次液体（避免气泡出现）

3、混匀之后取90ul滴入检测卡内（本步骤应该在30s内完成），滴入完成之后，立即将检测卡放入CSY-YG701真菌毒素荧光定量检测仪中的恒温孵育器内孵育8分钟后进行检测。

致电：1 7 7 2 7 8 2 5 6 4 9